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人HLA-DR抗體酶聯免疫分析試劑盒說明書

簡要描述:人HLA-DR抗體酶聯免疫分析試劑盒說明書本生生物公司供應:ELISA試劑盒,血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養,吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器。

  • 產品型號:BS-11202
  • 產       地:天津市
  • 更新時間:2021-10-27
  • 訪  問  量:774
詳細介紹
品牌其他品牌產地國產
級別其他規格96T/48T

 HLA-DR抗體酶聯免疫分析試劑盒說明書  

本試劑盒僅供研究使用。  

檢測范圍:   96T  

6  pg/ml -300 pg/ml

使用目的:  

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中HLA-DR  抗體含量。  

實驗原理 本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人  HLA-DR  抗體水平。用純化的抗原包被微孔  板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入  HLA-DR  抗體,再與  HRP  標記的抗原結  合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過*洗滌后加底物  TMB  顯色。TMB  在  HRP  酶  的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的  HLA-DR  抗體呈正相關。用酶標儀在  450nm  波長下測定吸光度(OD  值),通過標準曲線計算樣品中  人  HLA-DR  抗體濃度。  

試劑盒組成  

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ; 2 酶標試劑 6ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 ; 4 樣品稀釋液  6ml×1 瓶
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ; 6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶
7 終止液 6ml×1 瓶; 8 標準品(48ng/ml)  0.5ml×1 瓶
9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶; 10 說明書 1 份
11 封板膜 2 張; 12 密封袋 1  個
標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能  馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融  

2.不能檢測含  NaN3 的樣品,因 NaN3  抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。  

操作步驟  

1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀  釋。   

40pg/ml   5  號標準品   150μl  的原倍標準品加入  150μl  標準品稀釋液   120pg/ml  

4  號標準品   150μl  的 

5  號標準品加入  150μl  標準品稀釋液   60pg/ml   3  號標準品   150μl  的  4  號標準品加入  150μl  標準品稀釋液   30pg/ml   2  號標準品   150μl  的  3  號標準品加入  150μl  標準品稀釋液   15pg/ml   1  號標準品   150μl  的  2  號標準品加入  150μl  標準品稀釋液   2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、  待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣  50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液  40μl,然后再加待測樣品  10μl(樣品最終稀釋度為  5  倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡  量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 3.  溫育:用封板膜封板后置  37℃溫育  30  分鐘。  

4.  配液:將  30  倍濃縮洗滌液用蒸餾水  30  倍稀釋后備用   5.  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置  30  秒后棄去,如此  重復  5  次,拍干。   6.  加酶:每孔加入酶標試劑  50μl,空白孔除外。   7.  溫育:操作同  3。   8.  洗滌:操作同  5。   9.  顯色:每孔先加入顯色劑  A50μl,再加入顯色劑  B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色   10  分鐘. 10.  終止:每孔加終止液  50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。   11.  測定:以空白孔調零,450nm  波長依序測量各孔的吸光度(OD  值)。  測定應在加終止 液后  15  分鐘以內進行。 

操作程序總結:

操作程序總結:.png

 

HLA-DR抗體酶聯免疫分析試劑盒說明書  

計算 以標準物的濃度為橫坐標,OD  值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的  OD  值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與  OD  值計算出標  準曲線的直線回歸方程式,將樣品的  OD  值入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。  

注意事項  

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡  15-30  分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未   用完,板條應裝入密封袋中保存。  

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。  

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好  控制在  5  分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。  

4.  請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD  值  大于標準品孔第一孔的  OD  值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n  倍)后再測定,計  算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。  

5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。  

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.   8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。  

9.本試劑不同批號組分不得混用。  

保存條件及有效期  

1.試劑盒保存:;2-8℃。  

2.有效期:6  個月

 


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