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操作ELISA試劑盒的實驗步驟及常見問題匯總

更新時間:2023-05-11    點擊次數:2292

  操作ELISA試劑盒的實驗步驟及常見問題匯總

 

  ELISA試劑盒實驗操作步驟的詳細說明:

  1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

  3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

  4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請*后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6.底物請避光保存。

  7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

  ELISA試劑盒實驗操作的常見問題。

  一、一次ELISA實驗需要多長時間?

  雙抗體夾心ELISA法一次實驗需要3.5-4小時,競爭ELISA法一次實驗需要2-2.5小時。

  二、血清樣本如何處理?

  全血標本于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

  三、血漿樣本如何處理?

  建議選擇EDTA或者檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,于1000×g離心15分鐘,仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

  四、細胞上清液樣本如何處理?

  檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細收集上清。

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