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本生PCR板—96孔板鋪板的小技巧
96孔板進行鋪板的?當細胞用96孔板接種時,細胞經常是不均勻分布。第二天就會發現有些地方出現堆積性生長,而還有不少地方細胞則很稀疏,細胞密集的地方因細胞與細胞之間的接觸抑制影響細胞的生長,這樣就很難評價干預因素對細胞的作用。因此,將96孔板種均勻也是進行后續實驗的將以用的老辦法和用的新方法比較一下,以讓大家看看各自優缺。
1、老方法:植板后,用手拿起96孔板,左右搖動,然后來回搖動幾次,但這種方法通常在2-3個細胞的5口井中分布不均勻。 在大多數情況下,中間的孔會出現成堆的分布,會讓人感到一陣麻煩。 再一次,看到一位老師將電路板放在振動器上并搖動幾分鐘。 結果更糟。 細胞都在中間。
通常,會在96孔板的每個孔上,加入100微升的細胞懸浮液。把它從左邊加到洞底。加入一半板材后,與未加入的細胞懸浮液混合,然后繼續加入剩余的一半板材。蓋上蓋子后,用左手輕輕握住木板的左邊,然后用右手輕拍木板的右邊緣。注意力集中在力量上(通常敲擊它三次)。太多或太多次會導致細胞堆積。順時針轉動盤子(逆時針方向不好) ,將剩下的三面逐一拍打,靜置5分鐘左右,然后放入37度的培養箱中。本生熒光定量PCR板
2、新方法:這種方法是非常好,非常均勻播種。使用等速吸引吸取細胞,然后吸移嘴對孔(注意尖不接觸孔槍頭底部)的側壁上,然后再慢慢敲除細胞吸管定植后,不要搖晃板,它只是可以直接在顯微鏡下被放置,這個方法可以被說成是有效的。
補充:從6孔板到96孔板,細胞應均勻分布分散。用培養基進行稀釋細胞,然后將培養板放置在適當的位置。添加一個細胞時和之后,請勿移動能力培養板;如果在空氣中沒有介質吹入,但是不要移動培養板,加入細胞后,靜置20-30分鐘,然后可以將其移入培養箱。這樣,細胞結構通常具有均勻生長。當然,提是細胞消化系統良好。
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